高通量組織研磨儀研磨破碎腫瘤組織細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)步驟
發(fā)布時(shí)間：2017-05-31 來(lái)源： 編輯：admin
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研磨破碎腫瘤組織細(xì)胞（如胰腺、肺、肝等器官的腫瘤組織），后續(xù)提取其RNA。
實(shí)驗(yàn)原理
通過(guò)研磨珠撞擊腫瘤組織細(xì)胞，使其細(xì)胞膜破裂，其內(nèi)的RNA暴露。
實(shí)驗(yàn)材料和器具
樣品：腫瘤組織細(xì)胞
儀器：高通量組織研磨儀（上海凈信，Tissuelyser-48）
耗材：離心管（上海凈信，0.4研磨單位），研磨珠（上海凈信，3號(hào)）
實(shí)驗(yàn)步驟
1.取組織塊解凍，用生理鹽水洗去血污，剪取約0.5g組織，剪小放入0.4研磨單位離心管中；
2.加入一粒6號(hào)的研磨珠，（如果用0.3研磨單位的離心管，加入三或五粒的3號(hào)的研磨珠），加入0.09體積 TES混勻，再加入0.01ml SDS（10%），0.001ml蛋白酶K（20mg/ml），充分混勻；
3.離心管放入研磨機(jī)中，設(shè)置參數(shù)13單位振頻，60秒，程序結(jié)束即可得到破碎原液；
4.完成后續(xù)RNA提取步驟。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
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